介紹
大腸桿菌引起之新生仔豬下痢對出生小豬而言是重要的疾病。本病係由腸毒型大腸桿菌(ETEC)分泌一至多種腸毒素(LT、STa或STb)及菌毛黏合素(F4、F5、F6等)，導致仔豬下痢。而初乳中的免疫球蛋白(即抗體)藉由阻斷細菌附著於腸上皮細胞之作用，以及中和細菌所產生之毒素，來達到疾病預防之效果[1]。
海博萊SUISENG®為多價疫苗，主要具有兩大功效，其一，可藉由母豬免疫後產生足夠的母源移行抗體，預防新生仔豬下痢；另一方面，則可預防諾維氏梭菌所引起的種豬猝死。
本試驗目的為評估豬隻經海博萊SUISENG®免疫後，血清中ETEC耐熱毒素(LT)之抗體免疫反應。檢驗方式採用ELISA測定血清中抗耐熱毒素(疫苗成分之一)之IgG抗體血清像，並針對耐熱毒素進行血清中和試驗檢測抗體之生物活性。
材料與方法
所有試驗母豬皆採用相同之免疫計畫，疫苗組於產前6週與前3週免疫兩次海博萊SUISENG®疫苗；對照組則於同時間給與安慰劑。母豬於試驗第0日(第一次免疫)、試驗第3週(第二次免疫)及試驗第6週(分娩)時採血，並以ELISA檢測IgG抗體力價，且所有檢體皆經同一試驗盤中之陽性及陰性對照進行校正。
中和試驗參考Guerrant等人發表文獻中耐熱毒素之細胞毒性試驗準則[2]，使用分娩時所採集之血清樣品進行檢測，檢測方法簡述如下：1 CU指可造成孔盤中50%細胞出現毒性反應之劑量。使用8 CU細菌生成之耐熱毒素與2倍連續稀釋之母豬血清樣本混合，再接種於細胞進行培養，觀察毒素造成的細胞病變作用(CPE)。當細胞出現毒性反應CPE時，表示該測定血清無法中和毒素，此結果判定為陰性；相反的，如果細胞沒有出現CPE則判定為陽性反應，表示該測定血清具有中和毒素之抗體。每次操作皆進行陽性對照試驗，以驗證所使用之毒素力價介於標準值範圍。
結果
IRPC平均抗體力價分布情形如下圖1所示，每點表示同組的5頭母豬平均抗體力價。
圖1、ELISA抗體反應
將連續稀釋後仍具有中和能力之稀釋倍率定義為血清中和力價，試驗結果列於下表，實驗之抗體定量極限小於或等於64倍。
表1、分娩時之耐熱毒素中和抗體力價
討論
本試驗證實母豬免疫海博萊SUISENG®疫苗可產生對大腸桿菌耐熱毒素之特異性抗體，於中和試驗結果顯示經免疫刺激所產生之抗體具有生物活性，並能夠完全中和細菌毒素。中和ETEC之耐熱毒素可有效預防因ETEC感染所致之下痢症狀，而使用海博萊SUISENG®疫苗免疫可提供中和此毒素之高力價抗體。
參考文獻
- Fairbrother JM, 1999 In Diseases of Swine 8th Ed pp 433-441.
- Guerrant et al. 1974, Infect Immun 10(2): 320-327.
原始資料
